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一、酸清洗的目的 去除殘留物:清洗可以去除系統(tǒng)中因樣品分析而殘留的有機(jī)溶劑、鹽分和樣品基質(zhì)。 防止污染:有效清潔可以防止樣品間的交叉污染,確保后續(xù)分析的準(zhǔn)確性。 延長(zhǎng)色譜柱壽命:及時(shí)清洗可以減少色譜柱和系統(tǒng)組件的損壞。 二、清洗步驟 1. 準(zhǔn)備清洗溶液 酸清洗溶液:常用的清洗溶液有稀釋的鹽酸(HCl)或硝酸(HNO?),濃度一般為0.1% - 1%。 溶劑選擇:根據(jù)色譜柱的類型(如反相、親水或離子交換柱)選擇適宜的酸性清洗溶液。建議使用與色譜柱相容的溶劑。 2. 設(shè)備準(zhǔn)備 檢查系統(tǒng):在開始清洗之前,檢查HPLC系統(tǒng)是否正常工作,確保所有連接無漏損。 準(zhǔn)備廢液收集器:清洗過程中會(huì)產(chǎn)生廢液,需準(zhǔn)備好收集容器。 3. 清洗流程 沖洗系統(tǒng):
將清洗溶液(如稀酸)注入HPLC系統(tǒng),流速通常設(shè)定為0.5-1.0 mL/min。 運(yùn)行清洗溶液約15-30分鐘,讓酸性溶液充分通過系統(tǒng)及色譜柱。 更換流動(dòng)相:
清洗結(jié)束后,立即將流動(dòng)相更換為適合的溶劑(如去離子水或適合的有機(jī)溶劑),沖洗系統(tǒng)以去除酸性溶液殘留物。 繼續(xù)運(yùn)行清洗溶劑約15-30分鐘。 系統(tǒng)穩(wěn)定:
監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的基線和壓力,確保系統(tǒng)在清洗后恢復(fù)到正常狀態(tài)。 三、純化步驟 1. 選擇合適的純化溶劑 根據(jù)待分析樣品的性質(zhì)及其在色譜柱上的行為,選擇合適的純化溶劑或流動(dòng)相。 2. 進(jìn)行純化 樣品準(zhǔn)備:將待純化的樣品溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲校_保樣品濃度適宜。 注入樣品:使用自動(dòng)進(jìn)樣器將樣品注入HPLC系統(tǒng)。 運(yùn)行色譜:設(shè)定適當(dāng)?shù)纳V條件(如溫度、流速、檢測(cè)波長(zhǎng)等),運(yùn)行分離程序。 監(jiān)測(cè)分離過程:實(shí)時(shí)觀察色譜圖,分析樣品的分離效果,必要時(shí)優(yōu)化洗脫條件。 四、后續(xù)步驟 數(shù)據(jù)分析:通過分析色譜圖,確定各組分的分離效果和純度。 系統(tǒng)維護(hù):清洗完成后,定期進(jìn)行系統(tǒng)維護(hù)和檢測(cè),以保證設(shè)備的穩(wěn)定性和可靠性。 注意事項(xiàng) 安全防護(hù):在處理酸性溶液時(shí),務(wù)必佩戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備(如手套、護(hù)目鏡、實(shí)驗(yàn)服)。 廢液處理:酸性廢液應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室的廢物處理規(guī)定進(jìn)行處理,避免環(huán)境污染。 定期清洗:根據(jù)樣品的復(fù)雜程度和分析頻率,制定合理的清洗計(jì)劃,以維持系統(tǒng)穩(wěn)定性。 |


